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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:硫氧還蛋白5抗體 人肝外膽管上皮細(xì)胞 低分子質(zhì)量蛋白2抗體 小鼠前列腺干細(xì)胞 MCF2變換序列樣蛋白2抗體 小鼠肺小動脈平滑肌細(xì)胞 NK細(xì)胞抑制性受體2DL1抗體 DI TNC1大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:1052

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

骨髓

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8356

細(xì)胞簡介:

兔骨髓基質(zhì)分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細(xì)胞是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞,其中部分細(xì)胞有自我復(fù)制、高度增殖和多向分化能力,在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、心肌、骨胳肌、脂肪細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等間葉組織細(xì)胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細(xì)胞在自然條件下主要分化為成骨細(xì)胞,在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同,其在成骨細(xì)胞與成脂細(xì)胞分化之間呈反向變化。

方法簡介:

實(shí)驗室分離的兔骨髓基質(zhì)采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實(shí)驗室分離的兔骨髓基質(zhì)經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO2,5%

兔骨髓基質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit   ELISA

小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISAKit   ELISA

小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISAKit   ELISA

小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISAKit   ELISA

6號染色體開放閱讀框81抗體

周期素依賴性激酶9重組兔單克隆抗體

IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein

ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原

BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白

TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原

CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白

IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein

TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白

BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat monocyte chemotactic protein 4 (MCP-4/CCL13) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒

HumanGasicMucin,GMELISAKit 人胃粘液素(GM)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitfor2,3-DPG(Human2,3-Disphosphoglycerate,2)ELISAKit2,3-0酸甘油酸

飲料環(huán)(cyclamate)含量薄層色譜法定性試劑盒20

Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔骨髓基質(zhì)細(xì)胞大鼠谷酰胺(Gln)試劑盒 ,英文名: Gln ELISA Kit

Porcine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒

出血性大腸桿菌(EHEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-1Alpha/CCL3(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Alpha)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白1α

體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性試劑盒20

ELISAKit2,3-DPG2,3-0酸甘油酸

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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